流式細(xì)胞術(shù)原理

流式細(xì)胞術(shù)是一種細(xì)胞分析技術(shù)。

流式細(xì)胞術(shù)工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測得多個(gè)參數(shù)，具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)代最xian進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。

流式細(xì)胞術(shù)是一種用于細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞分類、生物標(biāo)志物檢測和蛋白質(zhì)工程的技術(shù)。將熒光標(biāo)記或有自身固有熒光細(xì)胞懸液，通過噴嘴噴射出，以單細(xì)胞流動(dòng)的液流，用波長可調(diào)的激光照射并逐一探測、記錄和分析每一個(gè)細(xì)胞的熒光，能以每秒幾千個(gè)細(xì)胞的速率，實(shí)時(shí)對(duì)這些細(xì)胞的物理或化學(xué)特征，進(jìn)行多參數(shù)分析。

流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟：

1、制備細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)

2、分裝，按照每個(gè)EP（1.5ml）管1-2*10 6個(gè)細(xì)胞分裝，3500rpm，4度離心。

3、用100ulPBS重懸，加入10ul大鼠血清封閉，4度避光30min。

4、加入相應(yīng)的熒光標(biāo)記的抗體，混勻，避光，4度孵育30min。

5、加入1mlPBS洗兩遍。

6、用200ul PBS重懸，經(jīng)紗布過濾轉(zhuǎn)至流式管，上級(jí)檢測。

細(xì)胞或者大小接近的顆粒物質(zhì)都可以檢測。

樣本通過鞘液的輸送，成單個(gè)隊(duì)列依次通過激光束。樣本事先可以根據(jù)檢測需要被熒光標(biāo)記，通過激光束的時(shí)候就會(huì)得到熒光信號(hào)，被記錄下來。可以同時(shí)標(biāo)記不同的熒光標(biāo)記做不同的檢查。優(yōu)點(diǎn)就是可以在短時(shí)間內(nèi)檢測大量的樣本（每秒幾千個(gè)到幾萬個(gè)細(xì)胞）。

主要應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷。國際上通用的白細(xì)胞和淋巴瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)就是靠流式細(xì)胞儀的分型來確定的。